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PCR實(shí)驗室 |
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基因擴(kuò)增實(shí)驗又稱PCR實(shí)驗,其特點(diǎn)是能將微量的DNA大幅增加,PCR是分子生物學(xué)研究和實(shí)驗的常規(guī)方法,廣泛應(yīng)用于生物學(xué)各個領(lǐng)域,如:檢驗艾滋病、乙型肝炎、禽疫病,癌基因的檢測和診斷,DNA指紋、個體識別、親子鑒別及法醫(yī)物證,動、植物檢疫,動物及其衍生產(chǎn)品檢測,動物飼料、化妝品、食品衛(wèi)生檢測,轉(zhuǎn)基因作物與轉(zhuǎn)基因微生物檢測等。
PCR實(shí)驗室平面布局
基因擴(kuò)增實(shí)驗室又稱PCR實(shí)驗室,實(shí)驗室原則上分為四個單獨(dú)的工作區(qū)域,前兩區(qū)為擴(kuò)增前區(qū),后兩區(qū)為擴(kuò)增后區(qū)。擴(kuò)增前區(qū)與擴(kuò)增后區(qū)應(yīng)嚴(yán)格分開。實(shí)驗材料、試劑、記錄紙、筆、清潔材料等,只能從擴(kuò)增前區(qū)流向擴(kuò)增后區(qū),即從試劑準(zhǔn)備區(qū)→樣品處理區(qū)→擴(kuò)增區(qū)→擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū),不得逆向流動。實(shí)驗室的氣流也應(yīng)從擴(kuò)增前區(qū)流向擴(kuò)增后區(qū),不得逆向流動。各工作區(qū)域應(yīng)設(shè)置緩沖間,工作間與緩沖間之間宜安裝連鎖裝置。不同功能的核酸檢驗工作區(qū)應(yīng)是分隔獨(dú)立的工作室,并有明顯的標(biāo)志,各區(qū)間不能直通。各區(qū)之間如果是緊密相連,需安裝物品傳遞窗。每個工作區(qū)域的頂部應(yīng)安裝紫外燈,紫外燈的波長為254 nm,安裝數(shù)量為每20 m2安裝一支40W的紫外燈。
實(shí)驗室較為理想的布局模式為有一個專用走廊,試劑準(zhǔn)備區(qū)、標(biāo)本制備區(qū)、擴(kuò)增區(qū)和產(chǎn)物分析區(qū)很規(guī)范地排列在一起,前三個區(qū)各有一個緩沖間,可供換工作服和工作鞋使用,頂上可裝一紫外燈。內(nèi)實(shí)驗區(qū)域設(shè)為正壓或常壓狀態(tài),緩沖間內(nèi)設(shè)為負(fù)壓狀態(tài)(可上設(shè)一抽風(fēng)裝置),使這三個區(qū)的空氣流向為由實(shí)驗區(qū)域內(nèi)向外,緩沖間內(nèi)通向內(nèi)實(shí)驗室和走廊的門可安裝一種連鎖裝置,當(dāng)一個門打開時,另一門必須處于關(guān)閉狀態(tài),防止出現(xiàn)兩個門同時打開的情況。產(chǎn)物分析區(qū)可不設(shè)緩沖間,但應(yīng)設(shè)為負(fù)壓狀態(tài)(裝一個排風(fēng)扇即可),使空氣流向由外向內(nèi),以防止擴(kuò)增產(chǎn)物的隨空氣流出。每一區(qū)域都須有明確的標(biāo)記,工作按試劑準(zhǔn)備區(qū)、標(biāo)本制備區(qū)、擴(kuò)增區(qū)至產(chǎn)物分析區(qū)單一流向進(jìn)行,各區(qū)的儀器設(shè)備包括工作服、鞋、實(shí)驗記錄本和筆等都必須專用。
如果無法作到以上模式,以下基本要求必須做到:
1、四個區(qū)域必須是相互獨(dú)立的;
2、各區(qū)的儀器設(shè)備及各種物品必須是專用的;
3、各區(qū)完全獨(dú)立,緩沖間可有可無。如為一個區(qū)套一個區(qū)的模式,區(qū)間不能直通,應(yīng)有緩沖間,供換工作服及鞋子用,并保證兩個區(qū)域間始終處于完全的分隔狀態(tài);
4、產(chǎn)物分析區(qū)應(yīng)安裝排風(fēng)扇或其它抽風(fēng)裝置,維持負(fù)壓。
實(shí)驗室空調(diào)通風(fēng)系統(tǒng)設(shè)計及壓力控制
各個區(qū)域之間應(yīng)具備單向的實(shí)驗工藝流、物流、人流與氣流,形成單向流程的保護(hù)屏障,避免實(shí)驗之間的相互干擾,防止核酸氣溶膠對實(shí)驗過程造成污染產(chǎn)生假性結(jié)果。PCR實(shí)驗室并沒有嚴(yán)格的凈化要求,但是為避免各個實(shí)驗區(qū)域間交叉污染的可能性,宜采用全送全排的氣流組織形式。同時,要嚴(yán)格控制送、排風(fēng)的比例以保證各實(shí)驗區(qū)的壓力要求。
實(shí)驗室裝修
實(shí)驗室的墻體,包括頂棚,應(yīng)結(jié)構(gòu)牢固、氣密性好;所有陰角宜采用圓弧形線條過渡;墻體內(nèi)壁光潔、不吸附、耐腐蝕、易清洗消毒;地面材料應(yīng)滿足無縫隙、無滲漏、光潔、耐腐蝕的要求。 |
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